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需要目標基因的上游存在一個特定的短的鹼基序列,我們稱之為PAM序列。如果實際操作中,目標基因上游到處都沒有PAM序列,那麼即使小剪刀找到了正確位置,也無法咔嚓一刀剪下去。
最後,小剪刀也是有脾氣的。有時,它的GPS沒有找到完全匹配的DNA片段,但小剪刀就是想剪。於是它便會隨便找一段類似的DNA片段,咔嚓一下剪下去。然後轉身就走,深藏功與名。
以上三種情況,在專業術語裡,叫做“脫靶”。
小剪刀很好用,但奈何小剪刀經常不做人。因此,這項技術的實際效果,目前來說並不理想。